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柱层析硅胶的操作技巧

柱层析硅胶的操作技巧

  • 分类:行业资讯
  • 作者:
  • 来源:
  • 发布时间:2022-01-15
  • 访问量:0

【概要描述】介绍柱层析硅胶的使用方法。
齐次法:
1、称重:200-300目硅,据说是30-70倍的上梁。如果非常困难,还可以使用100倍的硅H。干硅的试密度在0.4左右,所以叫40g硅,用烧杯用100ml也可以。

柱层析硅胶的操作技巧

【概要描述】介绍柱层析硅胶的使用方法。
齐次法:
1、称重:200-300目硅,据说是30-70倍的上梁。如果非常困难,还可以使用100倍的硅H。干硅的试密度在0.4左右,所以叫40g硅,用烧杯用100ml也可以。

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 介绍柱层析硅胶的使用方法。


1、称重:200-300目硅,据说是30-70倍的上梁。如果非常困难,还可以使用100倍的硅H。干硅的试密度在0.4左右,所以叫40g硅,用烧杯用100ml也可以。


2.均匀搅拌。添加了两倍干硅体积的溶剂,用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙 酮体系,则混合成石油醚。如果洗涤剂是氯 仿/酒精体系,则用氯 仿混合。如果不能均匀搅拌,就意味着溶剂的含水量太大。特别是乙炔/丙 酮,如果不与水一起分配光谱,就要用无水硫酸钠长期干燥。氯 仿用无水氯化钙干燥,去除1%的酒精。如果样品对酸敏感,就不能用氯 仿越过柱子。

柱层析硅胶

3.柱层析硅胶的支柱安装:柱下用棉花填满,不用海砂,加入体积石油醚(氯 仿)的约1/3,加入输液口,打开柱下活塞,一次将灯芯草倒入输液口。随着沉降,部分硅埋在输液口中,用石油醚(氯 仿)冲入柱子。


4.柱层析硅胶压缩:沉降完成后,再加入石油醚,用双球或气泵施加压力,加压到流速恒定为止。柱床压缩约9/10体积。无论是走常压柱还是加压柱,执行此步骤都可以大大提高分离度,防止柱床在越过柱时出现萎缩引起的裂缝。


5、柱层析硅胶上图:干湿工艺都可以。海事是不必要的。定型后加入洗涤剂,脱脂棉后将一块靠近硅表面的地方塞进去。然后可以放心地添加大量洗涤剂,而不会损坏硅表面。


6、果酒和收集:柱层分析实际上是扩散和分离之间的平衡。过低的洗脱强度不好。应该用渐变洗涤。收集的例子:10毫克相型量、1克硅H、0.5毫升1馏分1-2克相型量、50克硅(200-300目)、20-50毫升1馏分。


7.检查:应该更多地使用专用喷雾。只要使用紫外线,就会损失更多的产品,紫外线的灵敏度一般比喷雾底部高1 ~ 2倍左右。


8.收集的产品会漩涡,发送光谱之前通常需要重新决定。如果样品太少或液体,可以通过小凝胶柱,用作发送光谱之前的后面一种纯化手段。可以去除氢光谱1.5ppm左右的所谓“硅”峰。


干法上,一般用于固体或粘度大的液体样品。样品用低沸点溶解溶剂溶解,加入1-3倍的粗硅,晾干或晾干,柱层析硅胶干燥的标准是硅变成粉末,不粘在瓶壁上。在安装的柱子上留下一段溶剂,慢慢加入吸附样品的硅,使柱子振动,或者再加入溶剂,清洗附着在柱子墙上的硅。安装柱子的时候,不管是湿法还是干燥法,用橡胶管敲打都能比较均匀地装柱子,只有均匀地安装柱子,分离效果才会好。


一般柱层析硅胶的死体体积太大,很多分离物质重新合并在一起,分离失败Rf值有多少,取决于分离化合物。

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