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柱层析硅胶操作注意事项

柱层析硅胶操作注意事项

  • 分类:行业资讯
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  • 发布时间:2021-10-14
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【概要描述】柱层析硅胶操作注意事项
1 柱层析硅胶填料柱
柱下活塞不得涂润滑剂,会被淋洗液带入产品中,可使用聚四氟乙烯阀。 干法和湿法没有区别,只要能把立柱安装牢固就行。 填充柱应该相当紧密(太密,洗脱液流动太慢),并且需要均匀(否则样品会从一侧斜下落)。 书上写着看不到气泡。 我觉得在大多数情况下,一些小气泡并没有太大的作用,一加压,气泡就全部落了下来。 当然,如果你安装的柱子总是有气泡,那就说

柱层析硅胶操作注意事项

【概要描述】柱层析硅胶操作注意事项
1 柱层析硅胶填料柱
柱下活塞不得涂润滑剂,会被淋洗液带入产品中,可使用聚四氟乙烯阀。 干法和湿法没有区别,只要能把立柱安装牢固就行。 填充柱应该相当紧密(太密,洗脱液流动太慢),并且需要均匀(否则样品会从一侧斜下落)。 书上写着看不到气泡。 我觉得在大多数情况下,一些小气泡并没有太大的作用,一加压,气泡就全部落了下来。 当然,如果你安装的柱子总是有气泡,那就说

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柱层析硅胶操作注意事项

  1 柱层析硅胶填料柱

  柱下活塞不得涂润滑剂,会被淋洗液带入产品中,可使用聚四氟乙烯阀。 干法和湿法没有区别,只要能把立柱安装牢固就行。 填充柱应该相当紧密(太密,洗脱液流动太慢),并且需要均匀(否则样品会从一侧斜下落)。 书上写着看不到气泡。 我觉得在大多数情况下,一些小气泡并没有太大的作用,一加压,气泡就全部落了下来。 当然,如果你安装的柱子总是有气泡,那就说明你需要多练习。 但是立柱比较忌讳的是开裂,不管是竖管还是横管,都会影响分离效果,甚至失效!

柱层析硅胶

  2 柱层析硅胶取样

  用少量溶剂溶解样品并加入样品。 添加后,打开下活塞。 当溶剂层下降到石英砂表面时,加入少量低性溶剂,然后打开活塞。 它基本上是白色的。 加入淋洗液,开始时不要加压,待溶解样品的溶剂与样品层有一定距离(2~4cm即可),再加压,以免溶剂(如二氯甲烷等)从夹带样品和快速下降。  

  3 柱层析硅胶洗脱液的选择

  感觉在rf0.2~0.3左右做需要的点比较好。 不要以为爬上板子就更开阔了。 如果您越过该列,请使用该性。 如果rf为0.6,即使相差0.2也不容易在柱子上分离,因为柱子是多次爬升的状态。 通过公式对比:0.6/0.8一次的分辨率没有(0.2/0.3)的三次方或四次方那么大。

  4 柱层析硅胶样品的采集

  以硅胶为固定相通过柱子的原理是吸附与解吸的平衡。 因此,如果样品与硅胶之间的吸附力比较强,就不容易流出。 这种情况会发生,后面的点先出来,前面的点再出来。 此时,可以使用氧化铝作为固定相。 另外,采集试管的大小应根据样品量来确定,尤其是小样品。 如果您使用大试管,您可能会收到三个样品。 如果全部使用小试管,工作量太大。

  5 柱层析硅胶的处理

  柱分离后的产品使用了大量的溶剂,产品中的杂质也会在产品中积累。 因此,如果要送去分析,应该用少量溶剂清洗,因为大部分杂质都溶解在溶剂中。 洗涤后几乎消失,必要时重结晶。

  另外,通过柱子时,有时会出现气泡。 一是与使用的溶剂有关。 如果是易挥发的溶剂,如乙醚、二氯甲烷等,室温稍高的时候容易出现这种现象。 因此,当室温较高时,可以选择沸点较高、挥发相对较低的溶剂。 另外,在使用混合溶剂时,所用两种溶剂的沸点应相差不大,如乙酸乙酯和石油醚(60~90),而乙醚应选择30-60石油醚。 二是:无论是用砂板还是棉塞,装柱前一定要加压排空空气,防止柱子空转!

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