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层析硅胶操作方法是什么?

层析硅胶操作方法是什么?

  • 分类:行业资讯
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  • 来源:
  • 发布时间:2021-08-24
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【概要描述】层析硅胶过程以样品组相互不相容的两种“相”溶剂之间的分配系数差异(分配层分析)为基础,对吸附剂的吸附能力不同,分为离子交换、分子大小(电阻层分析),一般流动相称为气体,流动相为液体,称为液相层分析。

层析硅胶操作方法是什么?

【概要描述】层析硅胶过程以样品组相互不相容的两种“相”溶剂之间的分配系数差异(分配层分析)为基础,对吸附剂的吸附能力不同,分为离子交换、分子大小(电阻层分析),一般流动相称为气体,流动相为液体,称为液相层分析。

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  层析硅胶过程以样品组相互不相容的两种“相”溶剂之间的分配系数差异(分配层分析)为基础,对吸附剂的吸附能力不同,分为离子交换、分子大小(电阻层分析),一般流动相称为气体,流动相为液体,称为液相层分析。


  层析硅胶是多孔材料,分子具有硅氧烷的交叉结构,粒子表面有很多硅,硅吸附作用的强弱与硅的含量有关,硅可以通过氢键的形成吸附水分,因此硅的吸附力随着吸收水分的增加而降低。吸收量超过17%时,吸附力非常弱,不能用作吸附剂,但温度上升到500时,硅表面的硅酒精底座也会从脱水带转变为硅氧结合,因此,硅的激活不能在高温下进行(一般情况下,170以上的少量结合水消失)。


  层析硅胶是应用于中性或酸性成分分层的酸性吸附剂,硅胶是弱酸性阳离子交换剂,其表面的硅会释放弱酸性氢离子,遇到较强的碱性化合物时,可通过离子交换反应吸附碱性化合物。


  层析硅胶操作方法是什么?


  1.硅胶量的测定取一定量的硅后,根据要填充的柱子的体积和相刑量(相刑量5%以内),非常难区分的物质可以适当增加硅量。硅的密度在0.5-0.6左右,可以计算填充一定体积的柱子所需的硅质量。


  2.准备均匀化。加入两倍于干硅体积的溶剂,充分混合玻璃棒。如果溶剂是石油醚/乙酯体系,则用石油醚制备均质化。如果洗涤剂是酒精体系,则制备菌池。


  3.装填柱子。柱子底部出口关闭,用没有体板的可用棉花代替,加入约1/5体积的石油醚,一次性将灯芯草倒入柱子。然后打开柱子底部出口,关闭出口,直到硅床安顿下来(注意面值不要低于硅床)。


  4.压缩。沉降完成后,用双联工或空气泵施加压力,泵入洗涤剂,直到床稳定下来。


  5.就像原来一样。样品后,放入洗涤剂洗涤,可将脱脂棉放在硅胶床表面。添加流动相时,请不要损坏硅表面。


  6.越过柱子收集。可以用适当的龙利液洗涤,并根据样品情况以梯度洗涤。分离的样品由分部收集,具体各馏分的体积可以根据实际分离效果来决定,一般将柱子体积的10%收集到蒸馏点。


  7.检查。使用专用喷雾,只要使用紫外线检查,部分样品可能会丢失,紫外线的灵敏度一般比喷雾低1 ~ 2个左右。


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